黃花風鈴木的組培快繁技術(shù)-上海農(nóng)卉生物科技有限公司

黃花風鈴木的組培快繁技術(shù)

　　黃花風鈴木（ Tabebuia chrysantha ）為紫葳科風鈴木屬落葉喬木，原產(chǎn)墨西哥、中美洲、南美洲，現(xiàn)分布在世界熱帶地區(qū)，在我國華南地區(qū)和西南地區(qū)均有引種，引種十幾年來，已被廣泛應用于華南地區(qū)園林、庭院綠化，是良好的園林綠化與行道樹種。黃花風鈴木會隨四季變換不同的彩衣，具有春華、夏實、秋綠、冬枯的獨特風韻及呈現(xiàn)出良好的景觀效果，其花期在春季，花先葉開放，花冠風鈴狀，盛開時滿樹金黃，頗為壯觀，具有佳的觀賞價值。在我國南方的廣東、海南等省多用作行道樹、庭院樹以及園林樹種。木材可用于制造家具和樂器，樹皮具有重要的藥用價值；黃花風鈴木生長速度中等，耐熱、耐旱、耐瘠、抗污染、萌芽力強、易移植，不僅可以美化環(huán)境，而且具有良好的經(jīng)濟效益，是值得推廣和應用的良好景觀樹種。

　　黃花風鈴木的常規(guī)繁殖方式為播種育苗，但其種子壽命短，很容易喪失活力，需要即采即播，其種子成熟期在 4~5 月。因此，用種子繁殖受季節(jié)性限制，難以滿足市場的需求。而通過組織培養(yǎng)的方式進行苗木繁殖，其繁殖速度快，苗木質(zhì)量好，可達到苗木規(guī)�；a(chǎn)的目的。目前，國內(nèi)利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖黃花風鈴木的有關(guān)研究少，公開的只有 2 項相關(guān)的發(fā)明專利，或其中 1 項（“一種黃花風鈴木組織培養(yǎng)快速繁殖方法”CN201710170198.1）也是筆者所擁有的所有權(quán)專利。筆者根據(jù)試驗研究總結(jié)了黃花風鈴木的組培快繁技術(shù)，旨在提供一種實用、有效的育苗途徑，為實現(xiàn)黃花風鈴木的快速繁殖提供理論依據(jù)。

　　1 無菌苗的獲取

　　1.1 外植體的選取及處理

　　選擇黃花風鈴木的種子作為外植體。由于黃花風鈴木的果實成熟后會自然裂開，種子易隨風飄散，所以應在果實成熟而未開裂前，即由綠轉(zhuǎn)變成黃褐色時，及時采收，采收后曬干果實，等果莢自然開裂后抖出種子，并陰干。剝?nèi)ネ鈱臃N殼，取種仁，在超凈工作臺上以 0.1% HgCl 2 溶液消毒 8~10min，再用無菌水清洗4~5 次，瀝干水分。

　　1.2 初始培養(yǎng)

　　將已消毒處理好的種子接種至初始培養(yǎng)基上，初始培養(yǎng)基為 MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+ 蔗糖30g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。接種后暗培養(yǎng) 5d，再移至自然光照條件下培養(yǎng) 20d，培養(yǎng)溫度為 25±2℃。暗培養(yǎng) 5d 后種子開始萌動，在自然光照條件下繼續(xù)培養(yǎng) 5d 即可長出小苗，20d 無菌小苗可長至約 4cm 高。

　　2 不定芽的分化及增殖培養(yǎng)

　　2.1 不定芽的分化

　　將初始培養(yǎng)獲得的無菌苗剪切成長約 2cm的帶腋芽節(jié)段，接種到芽分化培養(yǎng)基上，芽分化培養(yǎng)基為MS（改良）+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸25mg/L+ 蔗糖 30 g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。接種時將帶腋芽節(jié)段斜插在培養(yǎng)基上，接種后放在培養(yǎng)室內(nèi)弱光條件下培養(yǎng)，光照較弱可促進不定芽的分化。培養(yǎng)溫度 25±2℃，光照強度 1000~1500Lx，每天光照12~14h，培養(yǎng) 20d 左右在腋芽處可分化出小芽。此時，將培養(yǎng)材料移到光照強度稍強的地方繼續(xù)培養(yǎng)，光照強度 2000~3000Lx，在培養(yǎng)溫度和光照時間不變的條件下，適當提高光照強度可促進已分化的小芽長高。

　　2.2 不定芽的增殖

　　待分化出的小芽長到 2cm 以上時，再將小芽切下，剪成帶腋芽的小段，轉(zhuǎn)接至芽增殖培養(yǎng)基上進行芽的增殖培養(yǎng)，每隔 30d 左右轉(zhuǎn)接 1 次。芽增殖培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件與芽分化培養(yǎng)相同，但隨著增殖代數(shù)的增加，需要根據(jù)培養(yǎng)材料的生長情況適當調(diào)整培養(yǎng)基配方或培養(yǎng)條件，以保證繼代苗正常生長，增殖系數(shù)達 3.0 以上。

　　3 生根培養(yǎng)及煉苗

　　3.1 生根培養(yǎng)

　　剪取生長健壯，長 3cm 以上的繼代苗接種至生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為 1/4MS+IBA1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂粉 4.5g/L，pH 值 5.8，生根培養(yǎng)的無機鹽濃度降低為 1/4MS 更有利于黃花風鈴木誘導生根。接種后放在培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng)，在根原基誘導的第一階段需進行一定時間的暗培養(yǎng)，有利于誘導生根。培養(yǎng) 12d 后小苗的基部切口處開始膨大長出愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng) 5d 后從愈傷組織處長出白色的根，生根率達 92%以上。然后移到弱光條件下繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為 25±2℃，光照強度1000~1500Lx，每天光照 12~14h。

　　3.2 煉苗

　　生根培養(yǎng) 25d 后，待小苗的根系基本長齊，將生根瓶苗移至煉苗棚進行煉苗，煉苗時間為 10d。煉苗棚必須采光良好，并配備有遮陽網(wǎng)，隨時可以調(diào)節(jié)光照強度。在剛從培養(yǎng)室移到煉苗棚的最初幾天，常需要適當遮蔭，以防強光灼傷幼苗，待小苗慢慢適應室外的環(huán)境后再加強光照，使組培生根苗木質(zhì)化程度逐漸增強，更能適應移栽后的生長環(huán)境。

　　4 生根苗移栽

　　4.1 育苗基質(zhì)準備

　　育苗基質(zhì)好壞常常是能否移栽成活和幼苗生長的關(guān)鍵。黃花風鈴木對土壤要求不嚴格，喜疏松肥沃、排水良好、富含有機質(zhì)的中性至微酸性壤土。因此，育苗基質(zhì)選用泥炭︰黃心土︰河沙 =2︰1︰1（體積比），將 3 種基質(zhì)混合均勻，分裝到育苗營養(yǎng)袋，然后擺放于育苗托上，再用 0.2%高錳酸鉀溶液對育苗基質(zhì)進行消毒，消毒后用清水將基質(zhì)淋透，置于溫室育苗棚內(nèi)備用。

　　4.2 生根苗移栽

　　將經(jīng)過煉苗的生根苗從培養(yǎng)瓶中取出，用清水輕輕地洗去小苗根系上附著的培養(yǎng)基，注意不要損傷根系和莖葉。移栽時先用鑷子在育苗營養(yǎng)袋的基質(zhì)挖 1個小穴，然后將洗干凈的生根小苗移栽至小穴內(nèi)，再用手輕輕將基質(zhì)壓一下，然后要淋透水，用薄膜覆蓋以保溫保濕。

　　4.3 移栽后管理

　　4.3.1 溫濕度控制。在生根苗移栽初期，光照不能過強或過弱，可以用遮陽網(wǎng)適度遮蔭，還要經(jīng)常噴霧澆水，保持環(huán)境相對濕度在 85%以上。保持溫室育苗棚溫度在 20~25℃，不宜過高，因為高溫高濕的環(huán)境易使小苗感病死亡，一般是較低的氣溫有利于緩苗。緩苗后（有初生新葉出現(xiàn)）逐步揭開薄膜適度通風，直至完全揭開。

　　4.3.2 病害防治和水肥管理。每周噴施 1 次殺菌劑，殺菌劑一般用甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅等抗菌藥，預防病害的發(fā)生，幾種殺菌劑可以交替使用，避免病菌產(chǎn)生抗藥性。移栽后 30d，隨著小苗的生長，進入后期管理，此時可在陰天時將苗木移出溫室育苗棚進行苗木常規(guī)管理。主要是淋足水，保持 60%~80%的相對濕度，定期施肥、噴農(nóng)藥。

　　5 結(jié)語

　　（1）以黃花風鈴木的種子作為外植體比較方便消毒，更容易獲得無菌材料。消毒前需剝?nèi)ネ鈱臃N殼，由于里面的種仁受外界污染少，因此消毒起來比較簡單，外植體污染率低。同時，種子要隨采隨用，避免因儲存過久影響種子的活力而降低種子的萌芽率。

　�。�2）黃花風鈴木不定芽的誘導和分化可以用同一種培養(yǎng)基，適合不定芽誘導和分化的培養(yǎng)基為 MS（改良）+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸 25mg/L+蔗糖 30g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。在增殖培養(yǎng)過程中培養(yǎng)材料容易出現(xiàn)褐化現(xiàn)象，在培養(yǎng)基中添加 L-半胱氨酸可以較好地控制材料在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的褐化現(xiàn)象，提高不定芽的分化率；同時，隨著增殖代數(shù)的增加，要注意激素的累積對培養(yǎng)材料生長的影響，需要根據(jù)培養(yǎng)材料的生產(chǎn)情況隨時適當調(diào)整激素的用量。

　�。�3）黃花風鈴木組培苗生根相對比較困難，經(jīng)過多次調(diào)試，發(fā)現(xiàn)降低培養(yǎng)基中無機鹽濃度和蔗糖用量對其生根更有利。一般來說，生根培養(yǎng)基的鹽離子濃度和糖濃度均低于增殖培養(yǎng)基，降低無機鹽濃度可提高大多數(shù)植物的生根能力。適合的生根培養(yǎng)基為1/4MS+IBA 1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂粉 4.5g/L，pH 值 5.8。

　�。�4）生根苗在移栽前需進行煉苗，增加小苗的木質(zhì)化程度，對移栽成活更有利。移栽時基質(zhì)的選擇也很關(guān)鍵，黃花風鈴木喜疏松肥沃、排水良好、富含有機質(zhì)的中性至微酸性壤土，生根苗移栽在溫室大棚內(nèi)進行，溫室大棚內(nèi)的溫度比較高，水分蒸發(fā)量比較大，而泥炭土持水量大和保水性能好為植物生長提供一個更適合的環(huán)境，再添加適量黃泥土和河沙，可以提高基質(zhì)中的有機質(zhì)和增強其透氣性。移栽基質(zhì)選用泥炭︰黃心土︰河沙 =2︰1︰1（體積比）較好，移栽成活率較高。