1、促進腋芽形成和生長的激素
高等植物的每一個葉腋中都有腋芽,在一定條件下可使它生長·現(xiàn)在知道頂端優(yōu)勢抑制芽的生長可被外源的細(xì)胞分裂素打破,所以在利用這條途徑來增殖時,幾乎都要加人細(xì)胞分裂素。目細(xì)胞分裂素的持續(xù)作用,腋芽`斷分化和生長,逐漸形成芽叢·反復(fù)切割和轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)'就可在短期內(nèi)得到大量的芽·除了細(xì)胞分裂素以外,培養(yǎng)基中還經(jīng)常力。人低濃度的生長素,以促進腋芽的生長,但要防止愈傷組織形成。有時還加人低濃度的赤霉素,以促進腋芽的伸長。在實際操作中,一般高濃度細(xì)胞分裂素和低濃度生長素的配比,既能提高腋芽的增殖速度,也能保證腋芽的健壯生長,為后續(xù)的生根移栽打下良好基礎(chǔ)。如果細(xì)胞分裂素濃度過高.生長素濃度過低,會形成過于細(xì)密的嫩芽,雖然提高了增殖速度,但苗多而弱,降低了芽的質(zhì)量,不適宜作為生根或移栽用,這也是一種浪費。但這并不意味著促進腋芽的增殖必須同時需要生長素和細(xì)胞分裂素。許多情況下只用細(xì)胞分裂素也可以得到優(yōu)質(zhì)的增殖芽。
2、誘導(dǎo)不定芽形成和生長的激素
除現(xiàn)有的芽之外,任何器官上的,通過器官發(fā)生重新形成的芽稱為不定芽。促進外植體形成不定芽,要使用一定量的細(xì)胞分裂素和生長素,一般濃度不能過高。否則不但器官分化能力降低,而且遺傳性難以穩(wěn)定。誘導(dǎo)外植體形成不定芽時,一般使用細(xì)胞分裂素的濃度高于生長素濃度的配比,但也經(jīng)常采用細(xì)胞分裂素和生長素濃度的比值接近于1的配比。有的材料還需加人低濃度的2,4-1)才能誘導(dǎo)不定芽的產(chǎn)生。具體應(yīng)用時應(yīng)查閱相關(guān)資料,并通過大量篩選來尋找最適當(dāng)?shù)募?xì)胞分裂素和生長素種類和濃度的配比。但總的原則還是如上所述,不能片面追求增殖率,既要求一定的增殖率,也要保證小苗的質(zhì)量。
3、促進胚狀體的形成和繁殖的激素
胚狀體發(fā)生途徑的優(yōu)點是增殖率高,而且同時具有胚根和胚芽,可免去生根,F(xiàn)在胚狀體發(fā)生還不普遍或產(chǎn)生的胚狀體難以成株或成株率太低,以及遺傳性尚不穩(wěn)定,故僅在有限植物中應(yīng)用。一般是在含有豐富還原氮的培養(yǎng)基上,加人生長素,特別是加人2,4一D以誘導(dǎo)胚狀體的發(fā)生,然后轉(zhuǎn)移到降低濃度或沒有生長素的培養(yǎng)基上使其成熟、萌發(fā)和生長。在培養(yǎng)基中,還可加人其他附加成分,如氨基酸、水解乳蛋白(LH)300~500mg/L、水解酪蛋白(CH)200、500mg/L,以及腺嘌呤(ADE)I、80mg/L等,以促進試管苗的生長。