紅掌組培快繁技術(shù)分析-上海農(nóng)卉生物科技有限公司

紅掌組培快繁技術(shù)分析

　　紅掌是天南星科花燭屬多年生附生常綠草本花卉，節(jié)間短，株高可達(dá)1m，葉片單生，長(zhǎng)圓狀、心形或卵圓形，深鮮綠色，有光澤。佛焰苞直立張開(kāi)，蠟質(zhì)，卵圓形或圓形，深紅色或橙色。其變種的佛焰苞有不同的顏色，如鑲嵌白綠色、五彩色、乳白色及有精巧紅邊等，極富變化[1]。紅掌的果實(shí)是小漿果，果內(nèi)有種子，粉紅，2～4粒。紅掌的種子成熟需6～7個(gè)月，易失去活力，不易保存，常用的分株繁殖方式難以擴(kuò)大生產(chǎn)。因此，離體快繁成為紅掌產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的理想途徑。紅掌是天南星科植物中較為的觀花觀葉兼宜的觀賞植物，市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景。前人的研究成果表明，紅掌組織培養(yǎng)中外植體誘導(dǎo)技術(shù)已經(jīng)成熟，但存在再生系統(tǒng)建立緩慢和增殖率不高的問(wèn)題[2,3]。本試驗(yàn)在前人研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究紅掌阿拉巴馬叢生芽團(tuán)塊增殖和壯苗培育的問(wèn)題，以期找出一條縮短紅掌繁育周期的途徑，促進(jìn)紅掌阿拉巴馬的商品化生產(chǎn)。

　　1、材料與方法

　　1.1試驗(yàn)材料

　　以紅掌品種阿拉巴馬的嫩葉為外植體，在清水中沖洗20min，擦干水后，在0.1%HgCl2中消毒15min，用無(wú)菌水沖洗3遍后，切割成1cm×1cm大小的葉片塊，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò)40d的誘導(dǎo)，產(chǎn)生愈傷組織，愈傷組織在增殖過(guò)程中產(chǎn)生芽團(tuán)塊，以芽團(tuán)塊為本試驗(yàn)增殖的材料。

　　1.2試驗(yàn)方法

　　1.2.1叢生芽增殖。

　　取阿拉巴馬的叢生芽團(tuán)塊接種于培養(yǎng)基中，其中：6-BA設(shè)3個(gè)濃度梯度，分別為0.5、1.0、1.5mg/L;NAA設(shè)3個(gè)濃度梯度，分別為0.05、0.10、0.20mg/L;KT設(shè)3個(gè)濃度梯度，分別為0.2、0.4、0.8mg/L。共設(shè)6個(gè)處理，分別為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+KT0.8mg/L(A1）、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+KT0.4mg/L(A2）、MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L(A3）、MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+KT0.8mg/L(A4）、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+KT0.4mg/L(A5）、MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L(A6），各培養(yǎng)基中均添加7.6mg/L瓊脂、25mg/L蔗糖。每瓶接種4塊叢生芽團(tuán)塊，大小為0.4cm×0.4cm，每個(gè)處理接種5瓶，共3次重復(fù)。培養(yǎng)條件為溫度25℃，光照強(qiáng)度1600lx，光照時(shí)間10h/d。

　　1.2.2壯苗培養(yǎng)。

　　取高約1.5cm的芽，接種在生根壯苗培養(yǎng)基中，6-BA濃度梯度分別為0、0.05、0.10mg/L,NAA濃度梯度分別為0.1、0.3、0.5mg/L,NH4NO3濃度梯度分別為1650、2475、3300mg/L。試驗(yàn)共設(shè)6個(gè)處理，分別為MS+6-BA0mg/L+NAA0.3mg/L+NH4NO33300mg/L(B1）、MS+6-BA0.05g/L+NAA0.5mg/L+NH4NO32475mg/L(B2）、MS+6-BA0.1g/L+NAA0.1mg/L+NH4NO31650mg/L(B3）、MS+6-BA0mg/L+NAA0.3mg/L+NH4NO33300mg/L(B4）、MS+6-BA0.05mg/L+NAA0.5mg/L+NH4NO32475mg/L(B5）、MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L+NH4NO31650mg/L(B6），各培養(yǎng)基中均添加7.6g/L瓊脂、25g/L蔗糖。每瓶接種7個(gè)小芽，每個(gè)處理5瓶，共3次重復(fù)。培養(yǎng)條件為溫度25℃，光照強(qiáng)度1600lx，光照時(shí)間10h/d。

　　1.2.3組培苗瓶外生根。

　　選取生長(zhǎng)良好、帶有3張葉片、高3cm的組培幼苗為材料，經(jīng)1周的煉苗后，洗干凈培養(yǎng)基后種植于不同的培養(yǎng)基中，并配合不同的促根處理，45d后統(tǒng)計(jì)苗的生根率及生根數(shù)。共設(shè)16個(gè)處理，分別為育苗泥炭土+IBA0.6mg/L、育苗泥炭土+IBA1.0mg/L、育苗泥炭土+NAA0.6mg/L、育苗泥炭土+NAA1.0mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+IBA0.6mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+IBA1.0mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+NAA0.6mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+NAA1.0mg/L、椰糠+育苗泥炭+IBA0.6mg/L、椰糠+育苗泥炭+IBA1.0mg/L、椰糠+育苗泥炭+NAA0.6mg/L、椰糠+育苗泥炭+NAA1.0mg/L、椰糠+珍珠巖+IBA0.6mg/L、椰糠+珍珠巖+IBA1.0mg/L、椰糠+珍珠巖+NAA0.6mg/L、椰糠+珍珠巖+NAA1.0mg/L。

　　1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

　　1.3.1叢生芽增殖。

　　每周觀察1次，1個(gè)月后統(tǒng)計(jì)叢生芽團(tuán)塊增重，計(jì)算公式如下：

　　叢生芽增重=接種1個(gè)月后的重量-接種前的重量

　　1.3.2壯苗培養(yǎng)。

　　每周觀察1次，1個(gè)月后統(tǒng)計(jì)苗高、新增葉數(shù)、苗重，計(jì)算公式如下：

　　苗高=接種1個(gè)月后的高度-接種時(shí)的高度；

　　新增葉數(shù)=接種1個(gè)月后的葉數(shù)-接種時(shí)的葉數(shù)；

　　苗重=接種1個(gè)月后的苗重-接種時(shí)的苗重。

　　1.3.3紅掌小苗瓶外生根。

　　每個(gè)處理種植組培苗50株，設(shè)3次重復(fù)，定植后放于70%遮陽(yáng)網(wǎng)下進(jìn)行統(tǒng)一栽培管理。60d統(tǒng)計(jì)移栽成活率及根系生長(zhǎng)情況[6]。

　　2、結(jié)果與分析

　　2.16-BA、NAA、KT對(duì)叢生芽團(tuán)增殖的影響

　　從表1可以看出，6-BA是影響叢生芽團(tuán)增殖的主要因素，各水平間差異顯著。隨著6-BA濃度的升高，叢生芽的重量增加呈直線上升趨勢(shì)，表明6-BA在叢生芽增殖中具有重要作用，其濃度為1.5mg/L，叢生芽增重量達(dá)到14.80g。NAA與叢生芽的增殖也成正相關(guān)關(guān)系。KT與叢生芽的增殖成負(fù)相關(guān)關(guān)系，隨著KT含量的增加，叢生芽團(tuán)的重量增加反而減少，這證明了KT不利于叢生芽的增殖。綜上所述，有利于叢生芽增殖的培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L+瓊脂7.6g/L+蔗糖25g/L。

　　2.2NAA、6-BA、NH4NO3對(duì)壯苗的影響

　　結(jié)果表明，6-BA是影響小苗增高重要的因素，NAA是次要因素。當(dāng)6-BA濃度是0.1mg/L時(shí)，芽高度增加明顯，隨著6-BA濃度的增加，苗增高量減少，故6-BA濃度為0.1mg/L，苗增高量達(dá)到1.63cm。NAA是影響葉片增加的重要因素，當(dāng)NAA濃度為0.05mg/L時(shí)，新增葉片數(shù)達(dá)15.71片，但新生葉片偏小。NH4NO3的濃度是影響小苗重量增加的主要因素，當(dāng)NH4NO3濃度為1650mg/L時(shí)，小苗重量增加，達(dá)到7.71g；隨著NH4NO3用量的增加，小苗的增重減少。

　　表1不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)叢生芽團(tuán)增殖的影響

　　2.3瓶外生根

　　紅掌組培快繁過(guò)程中，組培苗生根難，易產(chǎn)生愈傷組織，但是采用瓶外生根就可以很好地解決再產(chǎn)生愈傷組織的問(wèn)題。育苗泥炭土種植的組培苗生根率優(yōu)于其他基質(zhì)。在種植基質(zhì)中加入IBA和NAA,NAA的處理效果均不太理想，而IBA處理的組培苗生根率均明顯高于NAA處理。綜上所述，采用育苗泥炭土+IBA0.6mg/L生根率和成活率高。

　　3、結(jié)論

　　試驗(yàn)結(jié)果表明，在0.5～1.5mg/L的范圍內(nèi)，隨著6-BA濃度的增加，紅掌叢生芽增殖能力不斷增加，當(dāng)6-BA濃度增加至1.5mg/L時(shí)效果。在壯苗培養(yǎng)過(guò)程中，6-BA濃度與苗高增加量成負(fù)相關(guān)，其濃度為0.1mg/L;NAA濃度是影響葉片增加的重要因素，其濃度為0.05mg/L時(shí)新增葉片數(shù)達(dá)到15.71片，但新生葉片偏�。籒H4NO3濃度是影響小苗重量增加的主要因素，但隨著NH4NO3用量的增加，小苗的增重減少，NH4NO3濃度為1650mg/L時(shí)，苗重增值大。在瓶外生根試驗(yàn)中，使用育苗泥炭土+IBA0.6mg/L，組培苗成活率和生根率達(dá)到。